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革蘭氏染色液試劑盒也有使用方法?

發布時間:2021-11-19   點擊次數:197次
  革蘭氏染色液試劑盒革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,肽聚糖網層次較多且交聯致密,乙醇脫色時,肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結晶紫與碘復合物溶出,因此乙醇脫色后再經番紅復染,呈紅色。
 
  革蘭氏染色液試劑盒的操作步驟:
 
  1.涂片固定:菌液涂片時不可過于濃厚,干燥、固定。固定時通過火焰1-2次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。
 
  2。染色:一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:加上結晶紫后,染色,水洗。加上碘液后染色,水洗。加上酒精,搖動玻片,根據涂片厚度,脫色,水洗,吸去水分。加上蕃紅后,染色,水洗。吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。
 
  3.結果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應為準,過于密集的細菌,常常呈現假陽性。
 
  革蘭氏染色液試劑盒革蘭氏染色的關鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結果,如陽性菌培養時間過長,或已死亡及部分菌體自行溶解,都常呈陰性反應。
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